心臓の収縮

心筋細胞内カルシウムイオンの高速イメージング

難易度３

共焦点レーザー顕微鏡

膜輸送蛋白を研究する上で、輸送蛋白質自身および輸送される分子やイオンの空間分布に関する情報は重要です。 共焦点レーザー走査顕微鏡と各種蛍光プローブを用いる手法は、厚みのある生物試料に関するさまざまな情報を光学的断層像として得られる点で優れており、近年急速に普及してきました。

従来の光学顕微鏡との違い

従来の光学顕微鏡は標本全体を一様に照明し、標本全体の像を肉眼やビデオカメラで撮影して観察するという方法が用いられていました。
この方法では観察面において焦点からの光以外にその周辺から来る光をノイズとして含んでしまいます。特にＺ軸方向（光軸方向）に関しては分解能が低いため深さ方向全ての情報を拾ってしまうことになります。

これに対して、共焦点レーザー走査顕微鏡は励起光を蛍光物質を含んだ試料内の焦点に集光させて、その点から発せられた蛍光のみをフォトマルチプライヤー等の検出器で検出します。共焦点レーザー顕微鏡の原理図
通常の光学顕微鏡と比較して焦点面内の分解能はもちろん、深さ方向の分解能が飛躍的に改善されるのが特徴です。測定条件によっても異なりますが、ＸＹＺ各方向に０．５ミクロン程度の分解能まで期待できます。